[发明专利]基于金属配位的蛋白质分子印迹电化学传感器的制备方法

摘要

本发明公开了一种基于金属配位的蛋白质分子印记电化学传感器的制备方法，设计蛋白质分子印记电化学传感器的制备及应用领域，本发明在石墨烯修饰的玻碳电极上修饰上壳聚糖与金属铜离子的配合物，通过电聚合法在修饰电极表面制备分子印迹聚合物膜，从而制备具有特异性选择识别能力的分子印迹电化学修饰电极，提高分子印迹电化学传感器的灵敏度，对模板分子具有快速、高灵敏性选择识别能力，可以实现临床中溶菌酶蛋白Lyz的快速在线分析检测。

主权项

1.一种基于金属配位的蛋白质分子印迹电化学传感器的制备方法，其特征在于，该蛋白质分子印迹电化学传感器由工作电极、参比电极和对电极组成，所述参比电极设置为饱和甘汞电极，所述对电极设置为铂丝电极，所述工作电极采用分子印迹电化学修饰电极MIPs‑Cu‑CS/GR/GCE，所述MIPs‑Cu‑CS/GR/GCE通过如下步骤制备：（1）壳聚糖‑铜离子配合物修饰电极Cu‑CS/GR/GCE的制备：选取玻碳电极，对其进行表面处理，然后取分散好的石墨烯水溶液滴涂在玻碳电极表面，置于红外灯下烘干，制得石墨烯修饰电极GR/GCE；在得到的GR/GCE表面滴涂壳聚糖‑铜离子CS‑Cu溶液，晾干后得到Cu‑CS/GR/GCE；（2）印迹聚合物膜修饰电极Lyz@MIPs‑Cu‑CS/GR/GCE的制备：将步骤（1）得到的Cu‑CS/GR/GCE浸入含有模板蛋白、功能单体和交联剂的除氧的磷酸盐缓冲液中，其中模板蛋白为浓度1 g/L的溶菌酶Lyz，功能单体为浓度0.05~0.12 mol/L的甲基丙烯酸，交联剂为浓度0.01~0.2 mol/L的2‑乙基‑4‑甲基咪唑，在‑0.2 V ~ 1.2 V电位范围内，以100 mV/s的扫速循环伏安扫描5圈后取出晾干，得到Lyz@MIPs‑Cu‑CS/GR/GCE；（3）溶菌酶分子印迹电化学修饰电极MIPs‑Cu‑CS/GR/GCE的制备：将步骤（2）得到的Lyz@MIPs‑Cu‑CS/GR/GCE浸入一定浓度洗脱液中，采用循环伏安法在电压‑0.2V~ 1.2V、扫描速率100mV/s进行洗脱，溶菌酶分子Lyz被洗脱出来，得到MIPs‑Cu‑CS/GR/GCE。