[发明专利]一种将T淋巴细胞诱导成多能干细胞的方法有效

专利信息
申请号: 201510895176.2 申请日: 2015-12-07
公开(公告)号: CN105296432B 公开(公告)日: 2018-11-27
发明(设计)人: 陈海佳;葛啸虎;王一飞;罗二梅;张维敏 申请(专利权)人: 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N5/071
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 赵青朵
地址: 510000 广东省广州市国*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明涉及细胞培养技术领域,特别涉及一种将T淋巴细胞诱导成多能干细胞的方法。该方法包括:将含有干细胞转录因子基因的仙台病毒转染T淋巴细胞,获得感染细胞;将感染细胞与饲养层细胞混合,采用饲养层细胞培养基进行第一培养,然后弃饲养层细胞培养基,采用胚胎干细胞培养基进行第二培养,接着采用条件培养基和人胚胎干细胞培养基的混合液进行第三培养,最后采用人胚胎干细胞培养基进行第四培养,最终获得多能干细胞。本发明选择仙台病毒作为转染载体,避免病毒的基因组整合到供体细胞的基因组中,提高了iPS细胞的安全性;选择外周血T淋巴细胞作为iPS细胞的供体细胞,供体细胞来源简单;本发明方法可成功获得多能干细胞,其多能干细胞的转化率和纯度均较高。
搜索关键词: 一种 淋巴细胞 诱导 多能 干细胞 方法
【主权项】:
1.一种将T淋巴细胞诱导成多能干细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:将含有干细胞转录因子基因的仙台病毒转染T淋巴细胞,获得感染细胞;将所述感染细胞与饲养层细胞混合,进行第一培养,采用人胚胎干细胞培养基进行第二培养,然后采用饲养层细胞的条件培养基和人胚胎干细胞培养基的混合液进行第三培养,最后采用人胚胎干细胞培养基进行第四培养,获得多能干细胞;第一培养具体为:将感染细胞与饲养层细胞混合,采用饲养层细胞培养基进行培养,然后弃饲养层细胞培养基;条件培养基的配方为:P2代MEF细胞的培养上清液。
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