[发明专利]一种从山胡椒根中提取生物碱的制备方法及其用途

摘要

本发明公开了一种从山胡椒根中提取生物碱的制备方法及其用途，包括以下步骤：1）原料处理；2）酸性醇水溶液渗漉提取；3）山胡椒根总生物碱提取物浓缩液的制备；4）洗脱液的制备；5）‑8）化合物的制备及纯化。本发明采用酸性醇水溶液作为提取溶剂，反复回收利用提取，节约成本。并采用渗漉提取，浸出液可以达到较高浓度，能提高提取效率。此法常温操作不需加热，溶剂用量少，过滤要求较低，使分离操作过程简化。且提取物含杂质少、提取率高、使用溶剂量少。

主权项

1.一种从山胡椒根中提取生物碱的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）原料处理：取山胡椒根阴干至含水量为3‑8%后，粉碎，过20‑80目筛，得粗粉，备用；2）酸性醇水溶液渗漉提取：取步骤1）制得的粗粉，装入渗漉筒中，加1‑2倍量的pH值1‑2的酸性醇水溶液，其中醇的浓度为30％‑80％，浸润3‑6小时后装入渗漉桶中，用10‑18倍量上述酸性醇水溶液进行渗漉提取，调节流速，以10‑20mL/min流速收集渗漉提取液至山胡椒根粗粉中的生物碱浸提干净为止；采用薄层层析法，在紫外灯254nm下显棕黑色斑点，碘化铋钾溶液显橘黄色,所得提取液中加入碱水调节pH值至9‑10，然后加入有机溶剂萃取2‑6次，制得萃取液；所述提取液与有机溶剂的体积比为1:1‑3；其中色谱条件为：GF254薄层层析色谱，以氯仿：甲醇=6:1为展开剂，在254nm紫外光灯下显色观察；所述酸性醇水溶液为浓度为0.5‑2%的醋酸、盐酸、硫酸或酒石酸中的任一种；碱水为饱和的碳酸钠溶液或15‑25%的氨水；3）将步骤2）制得的萃取液，于水浴温度40‑55℃，真空度为0.09‑0.1Mpa的条件下进行减压浓缩，浓缩至浓缩液的浓度为0.5‑1.0g/ml，制得山胡椒根总生物碱提取物浓缩液；4）将步骤3）制得的山胡椒根总生物碱提取物浓缩液过硅胶柱色谱，用氯仿‑甲醇的体积比依次为10:1、8:1、6:1、4:1、2:1、0:1进行梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液经薄层色谱检测，合并相同组分，得A‑E共5个组分；进行抗肿瘤活性追踪，B、C组分抗肿瘤活性较好；5）对B组分，经反相柱色谱，用20‑100%的甲醇‑水梯度洗脱，洗脱液经薄层色谱检测，合并相同组分，回收洗脱液得B1‑B4共4个组分；6）将步骤5）制得的B2组分过硅胶柱，用氯仿‑甲醇进行纯化，得棕黄色固体化合物1和化合物2；氯仿‑甲醇的体积比为8:1；7）将步骤4）制得的C组分，经反相柱色谱，用30‑100%的甲醇‑水梯度洗脱，洗脱液经薄层色谱检测，合并相同组分，回收溶剂得C1‑C8共8个组分；8）将步骤7）制得的C4组分过凝胶柱，用30‑100%的甲醇‑水纯化，得棕黄色固体化合物3；所述化合物1为N‑甲基樟苍碱，其结构式为：所述化合物2为樟苍碱，其结构式为：所述化合物3为（+）‑Boldine，其结构式为：。