[发明专利]一种适用于高通量全基因组测序的多样品混合文库的构建方法

摘要

本发明提供了一种适用于高通量全基因组测序的多个样本混合测序文库的构建方法，将多个样品的基因组DNA分别打断集中带分布在500bp，打断后样品同时进行5’末端修复和3’末端添加碱基A，将不同样品的具有5’磷酸化和3’粘性末端A的DNA片段与含有不同条形码序列的接头相连，对连接产物进行低循环PCR，扩增产物纯化、混合，获得适用于高通量全基因组测序的多个样本混合测序文库。该方法的优点在于通量高、成本低、耗时短，产生的文库测序质量高，适用于大规模多样本测序文库的构建，在实现高通量SNP检测及标记开发、遗传图谱绘制、全基因组关联分析等研究中具有非常广阔的应用前景。

主权项

一种适用于高通量全基因组测序的多个样本混合测序文库的构建方法，包括以下步骤：(1)不同样品的基因组DNA打断，获得集中带分布在500bp的DNA片段；(2)同时对打断后的样品DNA进行5’磷酸化平末端修复和3’末端添加碱基A，获得具有5’磷酸化和3’粘性末端A的DNA片段；(3)分别将不同样品的具有5’磷酸化和3’粘性末端A的DNA片段与含有可以区分样品的唯一条形码序列的接头相连，获得可以区分样品来源的连接产物；(4)对含有不同条形码的连接产物分别进行PCR扩增，获得含有不同条形码序列的扩增产物，纯化，定量，混样；混合后的PCR产物进行琼脂糖凝胶分离纯化，纯化产物构成适于高通量测序的多个样本混合测序文库。