[发明专利]龙葵金属硫蛋白表面展示工程菌的构建方法及用途

摘要

本发明涉及工程菌株构建技术领域，特别涉及一种龙葵金属硫蛋白表面展示工程菌的构建方法，提取龙葵金属硫蛋白基因，以pYES2为出发载体，将载体上的诱导型启动子替换为组成型表达启动子，分别连接酿酒酵母的分泌信号肽基因和酿酒酵母锚定蛋白凝集素基因，将龙葵金属硫蛋白基因连在分泌信号肽基因和凝集素基因之间，表达载体转入大肠杆菌，提取载体质粒，转入酿酒酵母。本发明构建的龙葵金属硫蛋白表面展示工程菌，对Cd²⁺具有更强的吸附能力；对镉耐受能力也得到了显著的提升；吸附超痕量重金属的能力显著高于野生型酵母株和对照菌株；受pH影响小；能在Cd²⁺和Cu²⁺或Cd²⁺者Hg²⁺共存的情况下吸附重金属镉。

主权项

一种龙葵金属硫蛋白表面展示工程菌的构建方法，其特征在于提取龙葵金属硫蛋白基因，以pYES2为出发载体，将载体上的诱导型启动子替换为组成型表达启动子，将酿酒酵母的分泌信号肽基因连在组成型启动子之后，将酿酒酵母锚定蛋白凝集素基因的3’端序列连在启动子之后，将获得的龙葵金属硫蛋白基因连在分泌信号肽基因和凝集素基因之间，将构建好的表达载体转入大肠杆菌扩增得组成型表达表面展示载体，提取载体质粒，转入酿酒酵母。