[发明专利]一种转化合成2-PE的酵母静息细胞及制备和高收率转化合成2-PE的方法

摘要

本发明一种转化合成2‑PE的酵母静息细胞，中文命名：酿酒酵母SH003，英文命名：Saccharomyces cerevisiae SH003，于2015年6月19日保藏于位于中国·武汉·武汉大学的中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号CCTCC NO：M 2015389。本发明还公开了一种转化合成2‑PE的酵母静息细胞的制备方法，以及使用酵母静息细胞高收率转化合成2‑PE的方法。本发明采用酵母静息细胞生产2‑PE，细胞可重复利用，不需要在无菌条件下进行操作，反应液组分简单，采用乙醇作为辅助底物，对产物的分离纯化不造成影响，利用树脂原位吸附产物不仅可提高转化合成2‑PE产量，还可与提取工艺耦合，所生产的2‑PE产品香味纯正。与酵母细胞生长细胞生物转化2‑PE的工艺相比，具有生长周期短，易于提取，操作简便，成本低，环境污染小等优点，有较大的工业化应用潜力。

主权项

1.一种转化合成2‑PE的酵母静息细胞高收率转化合成2‑PE的方法，其步骤为：（1）取转化合成2‑PE的酵母静息细胞质量百分比浓度为8‑12%的菌悬液30mL于250mL的三角瓶中；所述转化合成2‑PE的酵母静息细胞，中文命名：酿酒酵母SH003，英文命名：Saccharomyces cerevisiae SH003，于2015年6月19日保藏于位于中国·武汉·武汉大学的中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号CCTCC NO：M 2015389；（2）向菌悬液中加入0.15‑0.45g的底物L‑Phe和0.3‑1.2g的辅助底物；所述辅助底物为乙醇、D‑甘露糖、蔗糖、葡萄糖中的一种；（3）再向混合液中加入促进转化合成的溶液A和溶液B，其中溶液A添加量20‑100uL，溶液B添加量20‑100uL；所述溶液A含有0.4‑1.0mol/L的Mg2+和0.2‑1.0mol/L的Zn2+；所述溶液B含有0.1‑0.5mol/L的维生素B1和1.0‑2.0mol/L的α－酮戊二酸；（4）将混合液置于25‑30℃下，100‑200r/min振荡反应16‑48h；反应结束后，离心转速3500‑5000r/min，离心5‑10min，上清液中即含制备的2‑PE。