[发明专利]生物粘合剂及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种生物粘合剂及其制备方法和应用，其中生物粘合剂包括Trx‑Balcp19k蛋白，所述Trx‑Balcp19k蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。其制备方法包括反转录、扩增、构建重组质粒、转化、诱导、亲和层析、透析等步骤，本发明的生物粘合剂粘附性能强、产量相对高、制备成本低，可应用于生理材料之间、非生理材料之间、生理材料和非生理材料之间的粘附。

主权项

一种生物粘合剂的制备方法，其特征在于，所述生物粘合剂为包括Trx‑Balcp19k蛋白，所述Trx‑Balcp19k蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述制备方法包括以下步骤：S1、从白脊藤壶软组织提取总RNA，反转录成第一链cDNA；S2、以步骤S1中第一链cDNA为模板，根据GenBank数据库中白脊藤壶Balcp19k基因序列设计引物进行PCR扩增得到扩增产物；S3、将所述步骤S2中得到的扩增产物连接到原核表达载体pET‑32a(+)中构建重组质粒；S4、将所述步骤S3中构建的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中得到转化子；S5、将所述步骤S4中的转化子进行IPTG诱导表达得到表达产物；S6、将所述表达产物进行镍亲和层析纯化得到Trx‑Balcp19k洗脱液；S7、将所述Trx‑Balcp19k洗脱液进行透析过夜，得到Trx‑Balcp19k蛋白，所述透析过程中采用的透析液为去离子水。