[发明专利]生物粘合剂及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201510534230.0 | 申请日： | 2015-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN105031717B | 公开（公告）日： | 2017-09-05 |
| 发明（设计）人： | 胡碧茹;曾玲;吴文健;刘志明;李韵秋 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军国防科学技术大学 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;A61L24/10;C09J189/00;C07K19/00;C12N15/70;C07K1/22 |
| 代理公司： | 湖南兆弘专利事务所(普通合伙)43008 | 代理人： | 赵洪,黄艺平 |
| 地址： | 410073 湖南省长沙市德雅路*** | 国省代码： | 湖南;43 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 生物 粘合剂 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种生物粘合剂的制备方法，其特征在于，所述生物粘合剂为包括Trx-Balcp19k蛋白，所述Trx-Balcp19k蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述制备方法包括以下步骤：
S1、从白脊藤壶软组织提取总RNA，反转录成第一链cDNA；
S2、以步骤S1中第一链cDNA为模板，根据GenBank数据库中白脊藤壶Balcp19k基因序列设计引物进行PCR扩增得到扩增产物；
S3、将所述步骤S2中得到的扩增产物连接到原核表达载体pET-32a(+)中构建重组质粒；
S4、将所述步骤S3中构建的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中得到转化子；
S5、将所述步骤S4中的转化子进行IPTG诱导表达得到表达产物；
S6、将所述表达产物进行镍亲和层析纯化得到Trx-Balcp19k洗脱液；
S7、将所述Trx-Balcp19k洗脱液进行透析过夜，得到Trx-Balcp19k蛋白，所述透析过程中采用的透析液为去离子水。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括以下步骤：将Trx-Balcp19k蛋白溶于溶剂中得到生物粘合剂。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中设计的引物为：SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列、SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S6中所述亲和层析具体包括以下步骤：
S6-1、将表达产物置于层析柱上用咪唑浓度为50mM～80mM的咪唑缓冲液漂洗层析柱，以去除非特异结合的杂蛋白；
S6-2、用咪唑浓度为250mM～300mM的咪唑缓冲液洗脱层析柱，获得Trx-Balcp19k洗脱液。
5.一种权利要求1至4中任一项所述制备方法制备得到的生物粘合剂。
6.根据权利要求5所述的生物粘合剂，其特征在于，包括Trx-Balcp19k蛋白和溶剂，所述Trx-Balcp19k蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述溶剂为水或体积浓度为5%～10%的醋酸。
7.一种权利要求5～6中任一项所述的生物粘合剂在生理材料之间粘结中的应用。
8.一种权利要求5～6中任一项所述的生物粘合剂在非生理材料之间粘结中的应用。
9.一种权利要求5～6中任一项所述的生物粘合剂在非生理材料与生理材料之间粘结中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国人民解放军国防科学技术大学，未经中国人民解放军国防科学技术大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510534230.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种有益于睡眠的保健品
- 下一篇：一种薰衣草茶及其制备方法
