[发明专利]一种同步鉴别动物源性成分的PCR方法及试剂盒

摘要

本发明属于肉类及动物源性相关产制品溯源和鉴定技术领域，具体提供一种同步鉴别动物源性成分的PCR方法及试剂盒，包括可以在一次PCR反应中同时鉴定山羊、绵羊、鹿、水牛、家牛、牦牛、猪和骆驼共8种动物源性成分的引物及鉴定方法，以及包含上述引物的试剂盒和应用方法。引物的核苷酸序列如SEQ ID1和SEQ ID2所示。本发明操作简单，特异性强，设备要求不高，能在一次PCR中同时鉴定8种动物源性成分。本发明技术适用于肉类及其产制品的掺假检测和溯源鉴定，方法简单快速，扩大了对未知物种的筛选范围，提高了检测效率。

主权项

一种鉴别山羊、绵羊、水牛、家牛、猪、鹿、骆驼和牦牛8种动物源性成分的PCR方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：1)提取待检测样品的基因组DNA，将提取的样品基因组DNA溶于TE溶液中保存备用；2)利用PCR引物对检测样品的基因组DNA进行PCR扩增反应；所用引物序列如下：上游引物：CCTCCCTAAGACTCAAGGAA；下游引物：AGCGGGTTGCTGGTTTCACG；PCR反应体系如下：2.0μL的Buffer缓冲液，0.2μL的上游引物和下游引物，1.6μL的dNTP mix，1.4μL的MgCl2缓冲液，3.0μL基因组DNA提取液，Taq DNA聚合酶0.2μL，最后加水补充至20μL；3)对PCR产物进行电泳检测，依据PCR产物条带大小和有无可判定检测样品中是否含有上述8种动物源性成分，其中山羊、绵羊、鹿、水牛、家牛、牦牛、猪和骆驼扩增后获得对应片段大小分别为760bp、737bp、537bp、486bp、481bp、464bp、429bp和359bp。