[发明专利]CIK及其制备方法有效
申请号: | 201510425461.8 | 申请日: | 2015-07-17 |
公开(公告)号: | CN105154398A | 公开(公告)日: | 2015-12-16 |
发明(设计)人: | 曾宪卓;成杰 | 申请(专利权)人: | 深圳爱生再生医学科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供一种CIK制备方法及由该方法制备的CIK,方法包括:获取单个核细胞,并用400~600U/mL的r-干扰素进行初次诱导培养后、继续第二次诱导培养和第三次诱导培养;其中,第二次诱导培养于200~300U/mL的r-干扰素、90~110ng/mL的CD3单抗、90~110ng/mL的CD28单抗、8~12ng/mL的IL-1a和450~550U/mL的IL-2条件进行;第三次诱导培养于40~60U/mL的r-干扰素、15~25ng/mL的CD3单抗、15~25ng/mL的CD28单抗、3.2~4.8ng/mL的IL-1a、450~550U/mL的IL-2和450~550U/mL的IL-15条件进行。本发明用不同条件进行分步诱导,使细胞性状稳定,从而最终收获到增值倍数较高的性状多样稳定的CIK细胞。 | ||
搜索关键词: | cik 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种CIK制备方法,其特征在于,包括如下步骤:获取单个核细胞;将所述单个核细胞用400~600U/mL的r‑干扰素进行初次诱导培养;将所述初次诱导培养后的细胞进行第二次诱导培养;其中,该第二次诱导培养于200~300U/mL的r‑干扰素、90~110ng/mL的CD3单抗、90~110ng/mL的CD28单抗、8~12ng/mL的IL‑1a和450~550U/mL的IL‑2条件下进行;将所述第二次诱导培养后的细胞进行第三次诱导培养;其中,该第三次诱导培养于40~60U/mL的r‑干扰素、15~25ng/mL的CD3单抗、15~25ng/mL的CD28单抗、3.2~4.8ng/mL的IL‑1a、450~550U/mL的IL‑2和450~550U/mL的IL‑15条件下进行。
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