[发明专利]多元电致化学发光DNA传感器及用于病毒的检测

摘要

本发明属于量子点和石墨烯应用技术领域，具体涉及一种基于双色CdTe量子点、石墨烯和金纳米粒子(Au NPs)构建的多元电致化学发光DNA传感器及用于同时检测俩种病毒目标DNA。该方法基于Au NPs标记的病毒探针DNA/病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE构建一种新型的和高灵敏的多元电致化学发光DNA传感器。与其他传感器相比，这个多元电致化学发光DNA传感器提供了一个简单、便捷、低成本和高灵敏的方法来同时检测人血清中乙肝病毒目标DNA和丙肝病毒目标DNA的含量。其具备良好的灵敏性、选择性、重复性和稳定性，可广泛应用于病毒目标DNA的检测。

主权项

一种多元电致化学发光DNA传感器，其特征在于：是由如下步骤制备得到：1)首先，使用1.0μm～0.05μm纳米氧化铝粉末α‑Al2O3将玻碳电极GCE抛光，抛光后的玻碳电极用蒸馏水、乙醇和蒸馏水超声清洗去除吸附的物质，然后纯氮气环境下吹干，得到表面抛光的玻碳电极；2)将10～30μL、0.10～0.3mg·mL‑1氧化石墨烯GO水溶液滴到步骤1)制备的玻碳电极表面，20～30℃下干燥，在GCE表面得到GO薄膜，记为GO/GCE；3)在0V到‑1.5V的电位下、0.1V s‑1～0.5V s‑1的扫描速率下、pH＝7.0～7.5的磷酸盐缓冲溶液PBS中，以玻碳电极作为工作电极、铂丝电极作为对电极、饱和甘汞电极作为参比电极，连续扫描步骤2)得到的GO/GCE10～20个周期，氧化石墨烯GO经过电化学还原得到石墨烯片层GNs，从而在GCE表面得到GNs薄膜，记为GNs/GCE；4)将5～10μL、530～550nm CdTe QDs标记的乙肝病毒捕获DNA和5～10μL、600～620nm CdTe QDs标记的丙肝病毒捕获DNA溶液一同滴到步骤3)制备的GNs/GCE表面，20～30℃下干燥，在GCE表面得到CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs复合薄膜，记为CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE；5)将步骤4)制备的CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE浸到与其碱基互补的乙肝病毒目标DNA和丙肝病毒目标DNA的混合溶液中，90～95℃下混合5～10min，然后快速冷却到20～30℃，在GCE表面得到病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs复合薄膜，记为病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE；6)将步骤5)制备的病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE进一步浸到与病毒捕获DNA碱基互补的Au NPs标记的乙肝病毒探针DNA和Au NPs标记的丙肝病毒探针DNA的混合溶液中，90～95℃下混合5～10min，然后快速冷却到20～30℃，在GCE表面得到Au NPs标记的病毒探针DNA/病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs复合薄膜，记为Au NPs标记的病毒探针DNA/病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE；从而得到结构为Au NPs标记的病毒探针DNA/病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE的多元电致化学发光DNA传感器。