[发明专利]一种检测牛MSTN基因mRNA表达水平的特异性引物和荧光定量检测试剂盒

摘要

本发明提供一种检测牛MSTN基因mRNA表达水平的特异性引物，所述特异性引物的核苷酸序列为上游引物序列为5’‑AACCAGGAGAAGATGGAC‑3’；下游引物序列为5’‑TTAGAGGGTAACGACAGC‑3’。本发明还提供相应的荧光定量PCR检测试剂盒。本发明实现了方便快捷的定量检测MSTN基因mRNA转录水平的目的，可以监测不同牛种（包括奶牛、黄牛和牦牛）、不同组织、不同时期的肌肉生长发育状态，同时可以鉴定牛肌肉发育异常相关的疾病。本发明在检测基因转录水平方面具有灵敏度高、稳定性好、实验成本低的优点。

主权项

一种牛MSTN基因mRNA表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于：所述牛为黄牛、奶牛和牦牛；所述PCR检测试剂盒由以下组分组成：2×SYBR GREEN MIX           5mL；阳性对照：标准MSTN基因模板   500μL；引物混合液                  500μL；超纯水                      5mL；其中，2×SYBR GREEN MIX由以下组分组成：Taq DNA聚合酶0.1 U/μL、dNTPs底物0.4 mmol/L、Mg2+ 5.0 mmol/L、KCl 100mmol/L、pH8.3的Tris·HCl 20mmol/L、质量百分含量为0.02%的明胶和SYBR Green染料；所述阳性对照的核苷酸序列参见序列表中SEQ ID No.3；所述阳性对照的浓度为0.8μmol/L；所述引物混合液由上游引物和下游引物组成，其中，上游引物序列为：5’‑AACCAGGAGAAGATGGAC‑3’；下游引物序列为：5’‑TTAGAGGGTAACGACAGC‑3’。