[发明专利]肿瘤特异性和可热调控的siRNA表达载体及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201510278224.3 | 申请日： | 2015-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN104830904B | 公开（公告）日： | 2019-04-02 |
| 发明（设计）人： | 唐丽灵;冯京;廖意;武艳娇;李丽;孙维超 | 申请（专利权）人： | 重庆大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/113;A61K48/00;A61P35/00;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人： | 赵荣之 |
| 地址： | 400044 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明公开了肿瘤特异性和可热调控的siRNA表达载体及其制备方法和应用，siRNA表达载体含有由肿瘤特异性启动子和热休克元件调控表达的siRNA表达框，制备方法简单，具有良好的肿瘤特异性，从而可以降低其对正常细胞产生的毒副作用，并且siRNA表达载体在热激的条件下可高效率地敲除目的基因，条件可控，并且避免外源诱导物引起的免疫反应，因此可用于肿瘤靶向治疗，具有很好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 肿瘤 特异性 调控 sirna 表达 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.肿瘤特异性和可热调控的siRNA表达载体在构建靶向干扰肿瘤治疗基因表达的载体中的应用，其特征在于：所述siRNA表达载体含有由肿瘤特异性启动子和热休克元件调控表达的siRNA表达框；所述肿瘤特异性启动子为人端粒酶逆转录酶启动子，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述热休克元件为HSE（MN）或HSE（XY），所述HSE（MN）的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述HSE（XY）的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述siRNA表达框的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；其构建方法如下：a.克隆获得人端粒酶逆转录酶启动子，然后合成热休克元件，所述热休克元件的核苷酸序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示；b.将步骤a克隆的人端粒酶逆转录酶启动子和热休克元件替换pMHSP70psil质粒的HSP70启动子，所述热休克元件位于所述人端粒酶逆转录酶启动子5’端；再将SEQ ID NO.8所示序列连入启动子的3’端，得肿瘤特异性和可热调控的siRNA表达载体。
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