[发明专利]一种迟发性耳聋基因多通道荧光PCR检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种迟发性耳聋基因多通道荧光PCR检测试剂盒，针对迟发耳聋相关基因PDS：IVS7-2A>G、2168A>G、1174A>T、1229C>T、1226G>A、1975G>C、2027T>A上共七个位点设计4对特异性引物和7条TaqMan探针，以人类管家基因β-Actin作为内参，设计1对特异性引物和探针，以监测样本模板、反应体系的有效性，避免出现假阴性，同时阴性、阳性质控的设定保证检测结果准确性。本发明首次实现了应用多通道荧光PCR方法在同一个反应管中同时检测迟发性耳聋的七个突变位点，该方法操作简便快速、准确、高通量、成本低，闭管操作避免交叉污染，使得耳聋筛查目的性强、筛查范围广，有效预防迟发性耳聋发生，易于推广及应用。

主权项

一种迟发性耳聋基因多通道荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，以PDS基因的IVS7‑2A>G、2168A>G、1174A>T、1229C>T、1226G>A、1975G>C、2027T>A突变为检测对象，设计特异性引物和探针，所述特异性引物包括用于扩增IVS7‑2A>G的引物1，其序列如序列表中SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；用于扩增2168A>G的引物2，其序列如序列表中SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示；用于扩增1174A>T、1229C>T、1226G>A的引物3，其序列如序列表中SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示；用于扩增1975G>C、2027T>A的引物4，其序列如序列表中SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示；所述探针为特异性检测PDS基因的IVS7‑2、2168、1174、1229、1226、1975、2027位点是否含有突变，其探针序列分别如序列表中SEQ ID NO:9至SEQ ID NO:15所示。