[发明专利]鞘氨醇单胞菌T‑3及其共发酵生产生物多糖和聚β羟基丁酸的方法

摘要

鞘氨醇单胞菌T‑3及其共发酵生产生物多糖和聚β羟基丁酸的方法。所述鞘氨醇单胞菌株(Sphingomonas sp.)T‑3，保藏号为CGMCC No.10150。该发明方法包括首先将菌株T‑3活化培养，并接种至种子培养基中，然后将种子液接种至发酵培养基中培养，发酵结束后经蒸馏水稀释，加热，膜分离上清液和菌体沉淀。上清液用盐酸调节pH至3.0左右，得到沉淀用NaOH调至pH中性，烘干得生物多糖。菌体沉淀经烘干后用氯仿抽提，上清经烘干得到聚β羟基丁酸。本发明所用的菌株T‑3在发酵时，胞内大量积累聚β羟基丁酸，同时向培养基中分泌大量生物多糖，所得两种产物可广泛应用于工业，食品，医疗等领域。

主权项

一种鞘氨醇单胞菌T‑3发酵生产生物多糖和聚β羟基丁酸的方法，具体方法为：(1)将鞘氨醇单胞菌T‑3单菌落接种至5ml的TPG液体培养基中，30℃振荡培养24小时；(2)将步骤(1)制得的培养液以1％的接种量接种至100或300ml的种子培养基中，30℃振荡培养24小时；(3)以10％的接种量将步骤(2)制得的种子液接种至玻璃摇瓶或发酵罐中，30℃，恒定pH 7.2，培养72小时；(4)将步骤(3)的发酵液用蒸馏水至少5倍体积稀释，90～105℃加热15分钟，膜分离发酵液和菌体沉淀；(5)将步骤(4)中膜分离后的上清液用稀盐酸调节pH至3.0得到果冻状沉淀，沉淀经NaOH调节至pH中性，将调节至pH中性的沉淀烘干得到生物多糖；(6)将步骤(4)中的菌体沉淀经烘干后研磨成粉末，加氯仿抽提，低速离心5分钟，上清液经60℃烘干除去氯仿，得到聚β羟基丁酸；其中：TPG液体培养基：葡萄糖10g/L,蛋白胨5g/L，酵母粉3g/L，牛肉浸粉3g/L；种子培养基：蔗糖10g/L，蛋白胨2.5g/L，酵母粉1.5g/L，K2HPO42.5g/L，MgSO40.1g/L，pH 7.0；发酵培养基：葡萄糖30～50g/L，豆饼粉0.5～2g/L，K2HPO41～2g/L，MgSO40.1～1g/L，NaNO31～2g/L，pH 7.0；所述鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)T‑3的保藏号为CGMCC No.10150，保藏日期为2014年12月10日。