[发明专利]从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺有效
| 申请号: | 201510103929.1 | 申请日: | 2015-03-10 |
| 公开(公告)号: | CN104611310A | 公开(公告)日: | 2015-05-13 |
| 发明(设计)人: | 陈石良 | 申请(专利权)人: | 陈石良 |
| 主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C07K14/415;C07K1/14 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 200129 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | 本发明公开了从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺。将新鲜辣木叶粉碎打浆,浸提,压滤,等电点沉淀,离心后得到沉淀物和上清液;对沉淀物进行修饰保护、热变性反应、冷冻干燥处理得超氧化物歧化酶(SOD)冻干粉;上清液经等电点沉淀、离心、喷雾干燥制得叶蛋白粉。本发明采用常温下浸提、等电点沉淀、修饰保护和离心分离等技术方法,最大限度地保持了蛋白质原有的功能特性和酶的活性,提高了蛋白质和活性酶的产量,得到的叶蛋白粉色泽好,蛋白质含量高,质量稳定,得到的超氧化物歧化酶(SOD)活性高,具有较高的实用价值和经济效益。本发明操作简单,生产成本低,安全可靠,适合工业化生产。 | ||
| 搜索关键词: | 辣木叶中 提取 蛋白质 超氧化物歧化酶 sod 工艺 | ||
【主权项】:
从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺,其特征在于:包括以下工艺步骤:(1)取辣木新鲜叶,除杂清洗,加入辣木鲜叶重量2~8倍的缓冲液,粉碎打浆,在常温下搅拌浸提1~4小时,压榨过滤,收集滤液;(2)将步骤(1)所得滤液进行高速离心分离,收集上清液;(3)取步骤(2)所得上清液,调整PH值至4.9~5.2,于0~4℃下静置30~40分钟后,高速离心,分别收集沉淀物和上清液;(4)取步骤(3)所得沉淀物,加入去离子水溶解,得超氧化物歧化酶(SOD)粗品溶液,将SOD粗品溶液加热升温至42℃,用2N NaOH溶液调整PH值至9.0,滴加SOD粗品溶液总质量0.01%~0.05%的修饰保护剂,搅拌,保温反应1小时后,快速冷却至30℃以下,离心,收集上清液,用1N HCl调整PH值至6.2~6.8,快速升温至60~70℃,不断搅拌,保温处理10分钟后,快速冷却至30℃以下,离心,收集上清液;(5)取步骤(4)所得上清液,边搅拌边缓慢加入上清液体积1.2~1.8 倍的预冷过的95%乙醇,于0~4℃下静置10~15分钟后,离心,收集沉淀,再用去离子水溶解,离心,收集上清液,冷冻干燥,即得超氧化物歧化酶(SOD)精品冻干粉;(6)取步骤(3)所得上清液,用1N HCl溶液调整PH值至4.0~4.3,于0~4℃下静置30~40分钟后,高速离心,收集沉淀,用缓冲液溶解,喷雾干燥,即得辣木叶蛋白粉。
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