[发明专利]从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶（SOD）的工艺

权利要求书

1.从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺，其特征在于：包括以下工艺步骤：

（1）取辣木新鲜叶，除杂清洗，加入辣木鲜叶重量2～8倍的缓冲液，粉碎打浆，在常温下搅拌浸提1～4小时，压榨过滤，收集滤液；

（2）将步骤（1）所得滤液进行高速离心分离，收集上清液；

（3）取步骤（2）所得上清液，调整PH值至4.9～5.2，于0～4℃下静置30～40分钟后，高速离心，分别收集沉淀物和上清液；

（4）取步骤（3）所得沉淀物，加入去离子水溶解，得超氧化物歧化酶(SOD)粗品溶液，将SOD粗品溶液加热升温至42℃，用2N NaOH溶液调整PH值至9.0，滴加SOD粗品溶液总质量0.01%～0.05%的修饰保护剂，搅拌，保温反应1小时后，快速冷却至30℃以下，离心，收集上清液，用1N HCl调整PH值至6.2～6.8，快速升温至60～70℃，不断搅拌，保温处理10分钟后，快速冷却至30℃以下，离心，收集上清液；

（5）取步骤（4）所得上清液，边搅拌边缓慢加入上清液体积1.2～1.8 倍的预冷过的95%乙醇，于0～4℃下静置10～15分钟后，离心，收集沉淀，再用去离子水溶解，离心，收集上清液，冷冻干燥，即得超氧化物歧化酶(SOD)精品冻干粉；

（6）取步骤（3）所得上清液，用1N HCl溶液调整PH值至4.0～4.3，于0～4℃下静置30～40分钟后，高速离心，收集沉淀，用缓冲液溶解，喷雾干燥，即得辣木叶蛋白粉。

2.根据权利1要求所述的从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺，其特征在于：上述步骤（1）中的缓冲液为PH值6.5～7.6、浓度为20mmol/L～200mmol/L、含5 mmol/L EDTA和20mmol/L焦亚硫酸钠的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾（Na₂HP0₄-KH₂P0₄) 缓冲液。

3.根据权利1要求所述的从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺，其特征在于：上述步骤（2）中的高速离心分离技术是采用连续离心机，转速大于15000r/min，离心20～40min。

4.根据权利1要求所述的从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺，其特征在于：上述步骤（3）中的高速离心分离技术是采用连续离心机，转速大于15000r/min，离心20～40min。

5.根据权利1要求所述的从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺，其特征在于：上述步骤（4）中的修饰保护剂是月桂酸酰胺。

6.根据权利1要求所述的从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺，其特征在于：上述步骤（6）中的高速离心分离技术是采用连续离心机，转速大于15000r/min，离心20～40min，缓冲液为PH6.5～7.6、20mmol/L～200mmol/L、含5 mmol/L EDTA和20mmol/L焦亚硫酸钠的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾（Na₂HP0₄-KH₂P0₄) 缓冲液。