[发明专利]一种纳米细菌16sRNA基因的鉴定方法有效
| 申请号： | 201510094762.7 | 申请日： | 2015-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN105200121A | 公开（公告）日： | 2015-12-30 |
| 发明（设计）人： | 郭君毅;吕宏迪;张新际;郝少君;明爱民;杨玉荣;张正臣 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三七一医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 四川君士达律师事务所 51216 | 代理人： | 芶忠义 |
| 地址： | 453000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种纳米细菌16sRNA基因的鉴定方法，该方法包括：根据纳米细菌16sRNA基因序列设计一对引物并进行引物合成；提取纳米细菌全基因组DNA；回收特异性扩增片段；扩增片段克隆到PMD-18T；转化的质粒进行核苷酸测序，将测序结果与纳米细菌16sRNA序列进行比较，鉴定新分离的纳米细菌。本发明发现所获得的特异性片段与基因库中的纳米细菌的16SrRNA基因高度一致，证实了从培养液中提取出的特异性片段即是纳米细菌的16SrRNA，也又一次证实纳米细菌是有生命的微生物。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 纳米 细菌 16 srna 基因 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种纳米细菌16sRNA基因的鉴定方法，其特征在于，所述的纳米细菌16sRNA基因的鉴定方法包括：步骤一、根据纳米细菌16sRNA基因序列设计一对引物如下：5’‑aacgaacgactggggcggcaggc‑3’；5’‑caccccagtcgctgaccc‑3’进行引物合成，Primer Name：A，Lot No：AW09639，TM：66.00；Primer Name：B，Lot No：AW09640，TM：64.13；步骤二、提取纳米细菌全基因组DNA，具体包括：(1)制备菌液，用于提取纳米细菌全基因组DNA的菌液有三种不同的来源：①从Ⅲ型前列腺炎患者EPS中获得；②从前列腺结石中获得；③从标本的培养液中获得；(2)按TIANDZ公司细菌DNAOUT使用手册V1.3进行操作；步骤三、用合成的引物进行PCR扩增；步骤四、回收特异性扩增片段；步骤五、扩增片段克隆到PMD‑18T；步骤六、转化的质粒进行核苷酸测序，将测序结果与纳米细菌16sRNA序列进行比较，鉴定新分离的纳米细菌。
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