[发明专利]可表达乙酰酯酶的大肠埃希氏菌及利用其制备乙酰酯酶的方法有效
| 申请号： | 201510077815.4 | 申请日： | 2015-05-03 |
| 公开（公告）号： | CN104762245B | 公开（公告）日： | 2018-09-11 |
| 发明（设计）人： | 陈玉香;吴志伟;佟金;徐立新;王庆洲;张东光;马丽娜;许田慧 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/18;C12R1/19 |
| 代理公司： | 长春市四环专利事务所(普通合伙) 22103 | 代理人： | 张建成 |
| 地址： | 130022 吉林省长春市人*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种可表达乙酰酯酶的大肠埃希氏菌，菌株中包括一种可表达乙酰酯酶的重组载体pKK223‑3‑ybaC，及利用该菌株液态发酵制备乙酰酯酶的方法为：将大肠埃希氏菌JM110（pKK223‑3‑ybaC）接种于氨苄LB液体培养基中于37℃、150rpm全温振荡培养箱中活化培养3d，吸取200µL菌悬液接种于氨苄LB液体培养基中于37℃、180rpm全温振荡培养箱中进行发酵，37℃过夜培养后加入终浓度为0.6mmol/L的IPTG，共计发酵5d，将发酵产物1000g，4℃低温离心8min，上清液即为乙酰酯酶粗酶液。本方法所需培养基简单，发酵条件为好氧发酵，易于控制，所制备的乙酰酯酶粗酶液酶活力高，最高可达42.66U/mL，此外，本发明所制备的乙酰酯酶有较高的温度耐受性，最适反应温度为51℃。 | ||
| 搜索关键词： | 乙酰酯酶 制备 大肠 振荡培养箱 粗酶液 菌株 发酵 菌悬液接种 温度耐受性 低温离心 发酵产物 发酵条件 好氧发酵 活化培养 液态发酵 重组载体 培养基 酶活力 上清液 接种 | ||
【主权项】：
1.一种可表达乙酰酯酶的大肠埃希氏菌，其特征在于：该大肠埃希氏菌为大肠埃希氏菌JM110(pKK223‑3‑ybaC)，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC 10507，其重组载体为pKK223‑3‑ybaC。
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