[发明专利]一种弱化发酵过程中乙酸积累以增强L‑色氨酸产量的基因工程菌及其构建方法有效
| 申请号： | 201510045201.8 | 申请日： | 2015-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN104651289B | 公开（公告）日： | 2017-09-26 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;刘莉娜;段绪果 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/75;C12N15/63;C12P13/22 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公布了一种弱化发酵过程中乙酸积累以增强L‑色氨酸产量的基因工程菌及其构建方法，属于代谢工程和基因工程领域。本发明以L‑色氨酸生产菌株(重组大肠杆菌)FB‑04(记作TS)磷酸乙酰基转移酶(Pta)为母本，采用分子生物学技术对其进行定点突变。在此改造下，Pta比活力为突变前的60.4％。利用Red重组技术，通过两步无痕基因替换法对TS基因组上pta基因进行突变，构建工程菌TS‑PtaP69L。此策略显著降低Pta的比活力，且发酵过程中工程菌TS‑PtaP69L与TS相比1)摇瓶发酵色氨酸含量增加80％，乙酸含量减少15.5％；2)3L发酵罐发酵色氨酸含量增加12.6％，乙酸含量减少73％。此色氨酸突变菌株具有更好的工业化发酵性能。该基因组定点突变策略也可用于提高产其他氨基酸大肠杆菌的发酵性能。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 弱化 发酵 过程 乙酸 积累 增强 色氨酸 产量 基因工程 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种弱化发酵过程中乙酸积累以增强 L‑ 色氨酸产量的基因工程菌，其特征在于，在 L‑ 色氨酸生产菌株大肠杆菌TS 基因组上将磷酸乙酰基转移酶编码基因内的一个碱基进行替换，导致其编码的第 69 位脯氨酸替换成亮氨酸，降低了磷酸乙酰基转移酶的比活力，发酵过程中副产物乙酸的积累减少，L‑ 色氨酸产量增加。
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