[发明专利]使用重叠引物和熔解探针检测单核苷酸多态性有效
申请号: | 201480061473.0 | 申请日: | 2014-11-10 |
公开(公告)号: | CN105705660B | 公开(公告)日: | 2021-03-16 |
发明(设计)人: | J.A.约翰逊 | 申请(专利权)人: | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6827 | 分类号: | C12Q1/6827 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 罗文锋;黄希贵 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本申请描述了在生物或非生物样品中的靶核酸中检测存在或不存在单核苷酸多态性(SNP)的方法。该方法可包括使用引物进行扩增的步骤,利用熔解探针杂交的步骤,和检测步骤,其中熔解探针的预定熔解温度的降低偏移指示SNP存在于样品中,而其中不存在熔解探针的预定熔解温度的降低偏移指示样品中不存在SNP。 | ||
搜索关键词: | 使用 重叠 引物 熔解 探针 检测 核苷酸 多态性 | ||
【主权项】:
一种在样品中检测靶核酸中的单核苷酸多态性(SNP)的方法,该方法包括:‑ 进行扩增步骤,其包括使所述样品与包含第一野生型核酸序列的寡核苷酸引物接触,当任何靶核酸存在于所述样品中时产生扩增产物;‑ 进行杂交步骤,其包括使所述扩增产物与寡核苷酸熔解探针接触,所述寡核苷酸熔解探针包含具有预定熔解温度的第二野生型核酸序列,其中所述寡核苷酸熔解探针的第二野生型核酸序列与所述寡核苷酸引物的第一野生型核酸序列重叠,并在所述SNP所位于的靶核酸区域上,在一端延伸出来一个或多个核苷酸;和‑ 检测所述扩增产物中存在或不存在所述SNP,其中所述寡核苷酸熔解探针的预定熔解温度的降低偏移指示所述样品中存在所述SNP,而其中不存在所述寡核苷酸熔解探针的预定熔解温度的降低偏移指示所述样品中不存在所述SNP。
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