[发明专利]细菌肝素前体-葡萄糖醛酸-5-差向异构酶以及使用其的多糖的制造方法有效
申请号: | 201480033636.4 | 申请日: | 2014-06-12 |
公开(公告)号: | CN105283549B | 公开(公告)日: | 2018-08-31 |
发明(设计)人: | 望月秀雄;山岸究;铃木喜义;金永植 | 申请(专利权)人: | 生化学工业株式会社 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N9/90;C12P19/26;C12P19/64 |
代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人: | 刘新宇;李茂家 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | 本发明提供一种具有细菌肝素前体‑葡萄糖醛酸‑5‑差向异构酶活性的多肽,以及提供一种制造己糖醛酸残基被异构化的多糖的方法。筛选非洲大蜗牛cDNA文库,得到对作用于N‑乙酰基细菌肝素前体的葡萄糖醛酸残基和/或完全脱硫酸化·N‑乙酰化肝素的艾杜糖醛酸残基的异构酶即细菌肝素前体‑葡萄糖醛酸‑5‑差向异构酶的多肽进行编码的DNA。在昆虫细胞中表达被该DNA编码的多肽,得到具有细菌肝素前体‑葡萄糖醛酸‑5‑差向异构酶活性的多肽。通过使该多肽与N‑乙酰基细菌肝素前体、或完全脱硫酸化·N‑乙酰化肝素接触,从而得到己糖醛酸残基被异构化的多糖。 | ||
搜索关键词: | 细菌 肝素 葡萄 糖醛酸 差向异构 以及 使用 多糖 制造 方法 | ||
【主权项】:
1.一种源自非洲大蜗牛的酶,其具有以下的(A)~(C)的特征:(A)具有将N‑乙酰基细菌肝素前体的葡萄糖醛酸残基异构化为艾杜糖醛酸残基的活性和/或将完全脱硫酸化·N‑乙酰化肝素的艾杜糖醛酸残基异构化为葡萄糖醛酸残基的活性;(B)实质上不具有将N‑硫酸化细菌肝素前体的葡萄糖醛酸残基异构化为艾杜糖醛酸残基的活性和/或将完全脱硫酸化·N‑再硫酸化肝素的艾杜糖醛酸残基异构化为葡萄糖醛酸残基的活性;(C)所述酶由以下的(c1)或(c2)的氨基酸序列组成,(c1)序列号2中的氨基酸编号1~601所示的氨基酸序列,(c2)序列号2中的氨基酸编号34~601所示的氨基酸序列。
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