[发明专利]同时对多种人乳头瘤病毒进行分型及检测的试剂盒及其应用

摘要

本发明涉及同时对多种人乳头瘤病毒进行分型及检测的试剂盒及其应用。首次揭示一种特别适合于诊断人乳头瘤病毒的分型和检测方法，所述检测方法经过合理的设计，适用于目前被广泛应用的四通道实时荧光定量PCR仪，不仅可以同时检测多种高危型病毒，而且检测程序简单易操作。本发明人还优化了PCR扩增反应程序，进一步提高了扩增效率。

主权项

一种同时对6种以上人乳头瘤病毒进行分型及检测的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)根据待测人乳头瘤病毒型别，分别提供特异性的扩增引物和检测探针：(a)针对第1种人乳头瘤病毒，提供特异性引物对1和检测探针1，该检测探针1连接荧光标记1，(b)针对第2种人乳头瘤病毒，提供特异性引物对2和检测探针2，该检测探针2连接荧光标记2，(c)针对第3种人乳头瘤病毒，提供特异性引物对3和检测探针3，该检测探针3连接荧光标记3，(d)针对第4种人乳头瘤病毒，提供特异性引物对4和检测探针4，该检测探针4连接荧光标记1或荧光标记5，(e)针对第5种人乳头瘤病毒，提供特异性引物对5和检测探针5，该检测探针5连接荧光标记2或荧光标记6，(f)针对第6‑X种人乳头瘤病毒，分别提供各自的特异性引物对6～X和检测探针6～X，该检测探针6～X连接荧光标记3或荧光标记7，其中，X为7～100的正整数；并且，提供(g)针对内参照的特异性引物对0和检测探针0，该检测探针连接荧光标记4；其中，荧光标记1～7是不同的；(2)提供PCR反应管1和2，在反应管1中，加入(a)～(c)以及(g)的引物对和探针；在反应管2中，加入(d)～(f)以及(g)的引物对和探针；反应管1和2中还包括PCR反应试剂；(3)将待测样本加入到(2)的反应管1和2中，通过四通道实时荧光定量PCR仪分别检测，分别得出反应管1和反应管2的荧光信号，从而实现第1种～第5种人乳头瘤病毒的分型和第6～X种人乳头瘤病毒的检测。