[发明专利]从橡胶树叶片中分离筛选拮抗细菌的方法无效
| 申请号： | 201410756455.6 | 申请日： | 2014-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN104480190A | 公开（公告）日： | 2015-04-01 |
| 发明（设计）人： | 郑肖兰;梁艳琼;胡加谊;吴伟怀;习金根;郑金龙;贺春萍;易克贤 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/18 | 分类号： | C12Q1/18;C12R1/125 |
| 代理公司： | 北京太兆天元知识产权代理有限责任公司 11108 | 代理人： | 张洪年 |
| 地址： | 571101 *** | 国省代码： | 海南;66 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种从橡胶树叶片中分离筛选拮抗细菌的方法，该方法采用常规的采样分离方法从病叶上分离到细菌，通过将细菌与供试菌橡胶树炭疽菌RC178进行对峙培养，获得一株对橡胶树炭疽病病原菌RC178有明显抑制作用的拮抗细菌。所分离的拮抗细菌常用作生防菌，有望制成微生物制剂，为橡胶树炭疽病生物防治提供基础准备。 | ||
| 搜索关键词： | 橡胶 树叶 片中 分离 筛选 拮抗 细菌 方法 | ||
【主权项】：
一种从橡胶树叶片中分离筛选拮抗细菌的方法，包括以下步骤：(1)采集橡胶感病叶片；(2)用升汞浸泡叶片，然后用无菌水冲洗；(3)将叶片放在PDA培养基上，28℃培养48h后将长出的菌体转接至相同的培养基上，28℃培养48h后纯化；同时，将纯化后所得的细菌采用梯度稀释涂布LB培养基中，28℃培养48h后挑取单菌落接至相应培养基斜面上；(4)将单菌落28℃震荡培养约12小时，吸取少量置于LB固体培养基上，涂抹均匀，28℃培养；然后通过无限稀释法处理获得单一菌株；(5)从菌株中筛选出细菌，转接到LB平板，用涂布平板法得到单菌落；对获得的单菌株与供试菌橡胶树炭疽菌RC178进行对峙培养；(6)通过观察有无抑菌圈，挑选出现抑菌圈的拮抗细菌。
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