[发明专利]高效产氢功能基因载体pETD-SL及其构建和应用

摘要

本发明公开了一种高效产氢功能基因载体pETD‑SL，及其构建方法和应用，涉及基因工程技术领域。pETD‑SL基因载体为包含有[NiFe]氢酶基因的pETDuet‑1质粒。其构建是通过设计引物扩增[NiFe]氢酶基因片段的大亚基hupL和小亚基hupS基因，并把上述两个基因片段用限制性内切酶酶切并用DNA连接酶将其相继连接到还有对应连接末端的pETDuet‑1片段中，进行基因测序，验证基因的完整性。将pETD‑SL质粒转化到细菌中，在产氢培养基中培养此细菌生产氢气。pETD‑SL能够应用于不同细菌中，既能使不产氢的细菌产氢，也能使产氢的细菌的产氢效率明显提高，消耗同样的底物浓度能产生更快更多的氢气。也能够改良现有工业产氢的大肠杆菌。

主权项

1.高效产氢功能基因载体pETD-SL，其特征在于，所述基因载体为包含有沼泽红假单胞菌的[NiFe]氢酶基因中大亚基hupL基因片段和小亚基hupS基因片段的pETDuet-1质粒。