[发明专利]一种家蚕核型多角体病毒快速检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明涉及一种家蚕核型多角体病毒快速检测试剂盒及检测方法，具体涉及一种环介导等温扩增技术与核酸检测侧向层析试纸相结合快速便捷的检测家蚕核型多角体病毒的检测试剂盒及其检测方法，属于病毒疫病诊断技术领域；所述检测试剂盒特征在于包括BmNPVLAMP预反应液，其中所需引物与探针根据GenBank公布的家蚕核型多角体病毒基因组序列的保守区域设计；采用所述试剂盒可有效快速检测家蚕核型多角体病毒，通过病毒DNA的提取和BmNPVLAMP反应体系的扩增步骤，在反应结束后利用核酸快速检测试纸判定结果，BmNPV病毒DNA获得高效特异性扩增；本检测方法具有简便快速、特异性好、灵敏度高的特点，适用于养殖户日常使用，有利于家蚕核型多角体病毒病的诊断与预防。

主权项

一种家蚕核型多角体病毒LAMP‑LFD检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：BmNPV LAMP预反应液，该反应液包括：1.2‑1.6mM 引物BmNPV‑FIP和BmNPV‑BIP，0.2‑0.4mM 引物BmNPV‑F3和BmNPV‑B3，0.05‑0.1μM 探针BmNPV‑FITC‑PROBE，20‑40mM Tris‑HCl (pH8.0～9.0)，10‑15mM 氯化钾，15 ‑20mM 硫酸铵，8‑10mM 硫酸镁，0.1‑0.2% Triton X‑100，0.6‑0.8M 甜菜碱，1.2‑1.4mM dNTP，6‑8U Bst DNA 聚合酶大片段；其中，引物BmNPV‑FIP序列见SEQ ID NO:1，引物BmNPV‑BIP序列见SEQ ID NO:2，引物BmNPV‑F3序列见SEQ ID NO:3，引物BmNPV‑B3序列见SEQ ID NO:4, 探针BmNPV‑FITC‑PROBE序列见SEQ ID NO:5。