[发明专利]在受体细胞的目的基因组序列引入变异的系统和方法在审
申请号: | 201410559802.6 | 申请日: | 2014-10-20 |
公开(公告)号: | CN104372016A | 公开(公告)日: | 2015-02-25 |
发明(设计)人: | 刘立新 | 申请(专利权)人: | 刘立新 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100037 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种在受体细胞的目的基因组序列引入变异的系统,所述系统包括:a)一个基因组DNA诱变序列GSMS表达盒,其中所述的GSMS表达盒包括一段和所述目的基因组序列同源的多聚核苷酸序列和一个引物结合序列,其中所述的GSMS表达盒产生GSMS RNAs;b)一个反转录酶表达盒,其中所述的反转录酶表达盒包括一段编码反转录酶的多聚核苷酸序列。本发明还提供了在受体细胞目的基因组序列引入变异的方法以及获得在目的基因组序列有随机变异的细胞群的方法。利用本发明所提供的系统和方法,可以在一段相对长的时间内在受体细胞中大量且持续的提供基因改造序列,提高靶向基因变异成功率。并且能够在靶向基因组区域引入大量随机突变。 | ||
搜索关键词: | 受体 细胞 目的 基因组 序列 引入 变异 系统 方法 | ||
【主权项】:
一种在受体细胞的目的基因组序列引入变异的系统,所述系统包括:a)一个基因组DNA诱变序列GSMS表达盒,其中所述的GSMS表达盒包括一段和所述目的基因组序列同源的多聚核苷酸序列和一个引物结合序列,其中所述的GSMS表达盒产生GSMS RNAs;b)一个反转录酶表达盒,其中所述的反转录酶表达盒包括一段编码反转录酶的多聚核苷酸序列,所编码的反转录酶可以是天然的或工程改造的反转录酶,并且所述反转录酶可以是有较好的校对功能或较差的校对功能;以及所述GSMS表达盒与反转录酶表达盒通过同一表达载体或不同表达载体导入到受体细胞中,在受体细胞中,所述GSMS RNAs被所述反转录酶反转录为ssGSMS cDNAs,并且所述ssGSMS cDNAs在所述目的基因组序列导致变异。
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