[发明专利]一种乙酰辅酶A含量测定试剂盒及其方法

摘要

本发明公开了一种乙酰辅酶A含量测定试剂盒及其方法，该试剂盒包括有：试剂一，由Tris-HCl、聚乙烯吡咯烷酮、巯基乙醇、苯甲基磺酰氟和甘油组成；试剂二，由苹果酸脱氢酶组成；试剂三，由柠檬酸合酶组成；试剂四，由苹果酸和氧化型辅酶I组成；试剂五，由Tris-HCl组成。苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和氧化型辅酶I生成草酰乙酸和还原型辅酶I，柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶A和草酰乙酸生成柠檬酸和辅酶A，利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应，乙酰辅酶A含量和原型辅酶I的生成速率成正比，340nm下吸光值的上升速率反应了乙酰辅酶A含量的高低。本发明操作简便，检测灵敏度高，回收率高，显著降低了试剂成本，本发明还简化了检测步骤，测定更加简便快捷。

主权项

  一种乙酰辅酶A含量测定试剂盒，其特征在于，包括以下试剂：试剂一，呈液体，4℃保存，由聚乙烯吡咯烷酮、巯基乙醇、苯甲基磺酰氟和甘油溶于浓度为50mM，PH=7.5的Tris‑HCl缓冲溶液后组成，置于试剂瓶中；试剂二，呈粉剂，‑20℃保存，由苹果酸脱氢酶组成，置于1.5mLEP管中；试剂三，呈液体，4℃保存，由柠檬酸合酶组成，置于1.5mLEP管中；试剂四，呈粉剂，‑20℃保存，由苹果酸和氧化型辅酶I组成，置于试剂瓶中；试剂五，呈液体，4℃保存，由浓度为50mM，PH=7.5的Tris‑HCl缓冲溶液组成。