[发明专利]用于测量细胞增殖的双标记法

摘要

本发明提供了利用核酸的双脉冲标记来测量细胞新生核酸合成的方法。使用核苷类似物进行的核酸的第一脉冲标记允许确定基线核酸合成速率。使用第二核苷类似物进行的核酸的脉冲标记允许测量核酸合成的任何变化。可将核酸合成测量为细胞增殖(DNA)或基因表达(RNA)。该方法在脉冲标记之间不需要潜在地引入假象的中间清洗步骤。此外，该方法通过在用竞争性核苷类似物进行处理的同时或在此之前用受试化合物处理细胞或生物体，可用于就对细胞增殖的作用筛选化合物。

主权项

1.用于测量细胞核酸合成的变化的非治疗目的的方法，其包括：a)将样品与有效量的第一核苷或核苷酸类似物一起温育以形成第一温育样品；b)将第一温育样品与至少一种第二核苷或核苷酸类似物一起温育以形成第二温育样品，其中所述至少一种第二核苷或核苷酸类似物是竞争性核苷或核苷酸类似物，并且其中在添加所述至少一种第二核苷或核苷酸类似物之前所述第一核苷或核苷酸类似物完全掺入细胞核酸，或者当所述至少一种第二核苷或核苷酸类似物存在时，所述第一核苷或核苷酸类似物不掺入细胞核酸；c)将第二温育样品与第一标记试剂和至少一种第二标记试剂一起温育以形成标记的样品；d)检测标记的样品，其中测量所述第一和至少一种第二核苷或核苷酸类似物的掺入水平，其中在与所述至少一种第二核苷或核苷酸类似物一起温育之前，不从样品中除去所述第一核苷或核苷酸类似物，其中将所述至少一种第二核苷或核苷酸类似物的掺入水平相对于所述第一核苷或核苷酸类似物的掺入水平的差异测量为细胞核酸合成的变化，前提是所述第一核苷或核苷酸类似物包含生物正交功能部分，并且所述至少一种第二核苷或核苷酸类似物包含卤素部分。