[发明专利]一种利用抗原量梯度生产羊抗Cys-C多抗血清的方法

摘要

本发明公开了一种利用抗原量梯度生产羊抗Cys-C多抗血清的方法，包括如下步骤：免疫原乳剂的制备，将含有Cys-C抗原4mg的血清0.1ml，无菌PBS1.9ml，弗氏佐剂2ml混合并乳化，得到免疫原乳剂；羊免疫第一针，在羊的前后腹股沟，每腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点，皮下注射，颈部两侧2个注射点平均注射；间隔二十天注射第二针，依次间隔十天注射3～8针，间隔七天对免疫的羊动脉采血，血液放入水箱中1小时温度40℃，待血清充分析出，经离心沉淀分离出抗血清，本发明将Cys-C抗原经皮下注入山羊腹股沟外并进行多次加强免疫，使其产生高效羊抗Cys-C抗体效价可达1:16以上。

主权项

一种利用抗原量梯度生产羊抗Cys‑C多抗血清的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)免疫原乳剂的制备，将含有Cys‑C抗原4mg的血清0.1ml，无菌PBS1.9ml，弗氏佐剂2ml混合并乳化，得到免疫原乳剂； 2)羊免疫第一针，在羊的前后腹股沟，每腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点，皮下注射，颈部两侧2个注射点平均注射； 3)与步骤2)间隔二十天注射第二针，前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点，颈部两侧淋巴结左右2个点； 4)与步骤3)间隔十天注射第三针，前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点； 5)与步骤4)间隔十天注射第四针，前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点； 6)与步骤5)间隔十天注射第五针，前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点； 7)与步骤6)间隔十天注射第六针，前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点； 8)与步骤7)间隔十天注射第七针，前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点； 9)与步骤8)间隔十天注射第八针，前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点； 10)与步骤9)间隔十天注射第九针，前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点； 11)与步骤9)间隔七天对免疫的羊动脉采血，血液放入水箱中1小时温度40℃，待血清充分析出，经离心沉淀分离出抗血清，放进冰箱保存温度在4℃—8℃之间； 12)对步骤9)所得抗血清进行效价测定。