[发明专利]一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸B和迷迭香酸的方法

摘要

本发明公开了一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸B和迷迭香酸的方法，将丹参药材粉碎、乙醇提取后，经大孔吸附树脂富集得到粗提物，粗提物进行高速逆流色谱分离，以体积比为1-5:5-10:1-5:1-10的溶剂A、溶剂B、溶剂C、溶剂D组成高速逆流溶剂体系，溶剂A为甲醇、乙醇、正己烷或异己烷，溶剂B为乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸正丁酯，溶剂C为甲醇、乙醇或丙酮，溶剂D为水，上相为固定相，下相为流动相，分别制得丹酚酸B、迷迭香酸。本发明采用采用高速逆流色谱法制备，不存在不可逆吸附，避免了样品的损耗，具有分离效果好，溶剂用量少，无污染，高效、快速的特点。

主权项

一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸B和迷迭香酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将丹参药材粉碎成粗粉，加入体积分数10％‑95％的乙醇水溶液中，加热至回流提取数次，提取液趁热过滤，冷却，滤液减压除去溶剂，得到乙醇提取物；(2)丹酚酸B、迷迭香酸的富集：将步骤(1)得到的乙醇提取物加入填充有大孔吸附树脂的色谱柱中，用水和甲醇或乙醇的混合溶剂梯度洗脱，收集含有丹酚酸B和迷迭香酸的洗脱液，减压回收溶剂，干燥、得到丹酚酸B和迷迭香酸的混合粗提物；(3)丹酚酸B、迷迭香酸的纯化：以体积比为1‑5:5‑10:1‑5:1‑10的溶剂A、溶剂B、溶剂C、溶剂D组成高速逆流溶剂体系，将所述高速逆流溶剂体系混合充分后静置，按上下两相分开，取上相为固定相，下相为流动相，将固定相充满高速逆流色谱仪的多层线圈分离柱，设定高速逆流色谱仪，在500～1000r/min转速下，以0.5～5ml/min的流速注入流动相，取步骤(2)得到的丹酚酸B和迷迭香酸的混合粗提物，用上相、下相体积比1：1的混合溶剂溶解后进样，分别收集丹酚酸B的流出液和迷迭香酸的流出液，浓缩、干燥，得到丹酚酸B、迷迭香酸；所述溶剂A为甲醇、乙醇、正己烷或异己烷，所述溶剂B为乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸正丁酯，所述溶剂C为甲醇、乙醇或丙酮，所述溶剂D为水。