[发明专利]一种登革病毒通用型CTL表位DNA疫苗制备和应用

摘要

本发明公开了一种登革病毒通用型CTL表位DNA疫苗，其是以真核表达质粒pcDNA3.1(‑)为载体骨架，以Igκ链信号肽为引导序列，包含有登革病毒1型中15个高度保守的免疫优势CTL表位和1个通用型辅助性T细胞表位，各表位间由1‑4个氨基酸组成的Linker连接。该DNA疫苗免疫HLA‑A*0201转基因小鼠、HLA‑A*1101转基因小鼠和HLA‑A*2402转基因小鼠后，可诱导产生CTL表位特异性分泌IFN‑γ的CTL，后者可以杀伤负载CTL表位的小鼠脾细胞和登革病毒1型感染的小鼠脾单核细胞。该DNA疫苗具有广泛人群覆盖率(通用型)，在登革病毒的免疫治疗和预防方面具有巨大的潜在价值。

主权项

1.一种登革病毒通用型CTL表位DNA疫苗，其特征在于，该DNA疫苗是在真核表达质粒pcDNA3.1(‑)中插入一段外源基因片段，编码的蛋白是以Igκ链信号序列为引导序列，包含有登革病毒1型中15个高度保守的免疫优势CTL表位和1个通用型辅助性T细胞表位，各表位间由1‑4个氨基酸组成的Linker连接；所述登革病毒1型中15个高度保守的免疫优势CTL表位和1个通用型辅助性T细胞表位如下表所示：表位名称序列(SEQ ID NO：)来源HLA限制性NS4a_140‑148GLLFMILTV(SEQ ID NO：3)DENV‑1 NS4aHLA‑A*0201NS5_880‑888DYMTSMKRF(SEQ ID NO：4)DENV‑1 NS5HLA‑A*2402NS5_183‑191LLMRTTWAL(SEQ ID NO：5)DENV‑1 NS5HLA‑A*0201NS3_472‑480QYIYMGQPL(SEQ ID NO：6)DENV‑1 NS3HLA‑A*2402NS3_548‑556SYKVASEGF(SEQ ID NO：7)DENV‑1 NS3HLA‑A*2402NS4b_40‑48TLYAVATTI(SEQ ID NO：8)DENV‑1 NS4bHLA‑A*0201NS4a_40‑48AYRHAMEEL(SEQ ID NO：9)DENV‑1 NS4aHLA‑A*2402NS2b_15‑23SILLSSLLK(SEQ ID NO：10)DENV‑1 NS2bHLA‑A*1101NS4b_159‑167WYDAKFEK(SEQ ID NO：11)DENV‑1 NS4bHLA‑A*1101NS5_561‑569ALLATSIFK(SEQ ID NO：12)DENV‑1 NS5HLA‑A*1101NS3_99‑107AVEPGKNPK(SEQ ID NO：13)DENV‑1 NS3HLA‑A*1101NS5_505‑513GVEGEGLHK(SEQ ID NO：14)DENV‑1 NS5HLA‑A*1101NS3_22‑30IYRILQRGL(SEQ ID NO：15)DENV‑1 NS3HLA‑A*2402NS2a_144‑152QLWATLLSL(SEQ ID NO：16)DENV‑1 NS2aHLA‑A*0201E_39‑47PTLDIELLK(SEQ ID NO：17)DENV‑1 EHLA‑A*1101PADREAKFVAAWTLKAAA(SEQ ID NO：18)通用型HLA‑DR表中所示表位通过1‑4个氨基酸组成的Linker连接，表中所示表位按照表位在CTL表位DNA疫苗中的先后顺序排列。