[发明专利]一组耐螯合剂乙二胺四乙酸的重组碱性木聚糖酶及其构建方法有效
| 申请号： | 201410115520.7 | 申请日： | 2014-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN104928270B | 公开（公告）日： | 2018-04-17 |
| 发明（设计）人： | 马延和;邢霞;王钦宏;涂然;彭彦峰 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 300308 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一组耐EDTA的碱性木聚糖酶和编码基因及其构建方法。采用定点诱变技术将碱性木聚糖酶酶编码基因xynA突变，得到突变基因xynA‑M‑W19Y、xynA‑M‑W19F和xynA‑M‑W19H，将其在E.coli BL21(DE3)进行诱导、表达、纯化，将纯化后的酶进行酶活测定，得到的木聚糖酶突变体XynA‑M‑W19Y、XynA‑M‑W19F和XynA‑M‑W19H具有较好的耐EDTA能力，其中在pH9.2，60℃，5mM EDTA的条件下，突变体W20Y的酶活比野生型XynA高近20％。这为碱性木聚糖酶的广泛应用奠定了良好的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一组 螯合剂 乙二胺四 乙酸 重组 碱性 聚糖 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种耐 EDTA 的重组碱性木聚糖酶，其特征在于：在 GenBank 收录号 EU421717.1 中含有的碱性木聚糖酶基因xynA，对应成熟木聚糖酶基因 xynA‑M，分别设计点突变引物 FP1和RP1，进行定点诱变，将公布的基因第56、57 位的鸟嘌呤G分别变成腺嘌呤A和胸腺嘧啶T，使得其编码氨基酸序列成熟肽的第19位的色氨酸W突变成酪氨酸Y，获得耐5～ 10mM EDTA 的重组碱性木聚糖酶XynA‑M‑W19Y。
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