[发明专利]利用电化学发光法检测治疗性抗体类药物的细胞结合活性的方法

摘要

本发明公开了一种利用电化学发光法检测治疗性抗体类药物的细胞结合活性的方法，包括1）将细胞铺于96孔板中，孵育；2）加入封闭液，孵育，进行封闭；3）缓冲液清洗后，加入治疗性抗体类药物，孵育；4）缓冲液清洗后，加入钌标记的抗人IgG，孵育；5）缓冲液清洗后，加入无表面活性剂的MSD read缓冲液；6）用MSD Sector Imager6000读96孔板，得到细胞结合活性结果。本发明大大提高了实验的精确度与灵敏度，大大缩短了时间，解决流式细胞仪检测细胞表面高表达受体所存在的仪器缺陷。

主权项

一种利用电化学发光法检测治疗性抗体类药物的细胞结合活性的放行检测方法，其特征在于，包括步骤：1)将细胞铺于96孔板中，孵育1～2h；2)加入封闭液，孵育30min～1h进行封闭；其中，封闭液是含体积浓度为10％～30％胎牛血清的缓冲液；3)缓冲液清洗后，加入治疗性抗体类药物，孵育1～2h；4)缓冲液清洗后，加入钌标记的抗人IgG，孵育1～1.5h；5)缓冲液清洗后，加入无表面活性剂的MSD read缓冲液；6)用MSD Sector Imager6000读96孔板，得到细胞结合活性结果；所述步骤6)中，细胞结合活性的评价标准是以相对活性进行评价，该相对活性的计算公式如下：其中，测得的活力是指MSD Sector Imager6000所测量得到的结果，预期的活力是通过紫外分光光度法检测UV280nm所测得的抗体浓度，并且相对活性为70％～130％则说明治疗性抗体类药物的生物学效力符合可接受标准。