[发明专利]一种检测EGFR基因外显子19缺失突变的试剂盒和方法

摘要

本发明涉及分子生物学领域，具体为检测人表皮生长因子受体基因EGFR外显子19缺失突变的PCR引物、TaqMan探针、PNA探针及试剂盒和检测方法；以数字PCR为平台，在反应体系中加入与野生型非突变模板序列互补的PNA探针，利用PNA探针的阻遏作用，使得只有发生了EGFR外显子19缺失突变的样本才能被扩增；并且利用TaqMan探针作为荧光定量标记，根据荧光检测判断样品中是否存在突变的模板及数量和比例。

主权项

一种检测EGFR外显子19缺失突变的PCR扩增引物，其特征在于，为反向PCR扩增引物和正向PCR扩增引物；正向引物含有以下核苷酸序列中的一种：F1:5’‑GAGAAAGTTAAAATTCCCGTCGCT‑3’，F2:5’‑GAAAGTTAAAATTCCCGTCGCTAT‑3’，F3:5’‑AAGTTAAAATTCCCGTCGCTATCA‑3’，F4:5’‑GGTGAGAAAGTTAAAATTCCCGTC‑3’，F5:5’‑AAGGTGAGAAAGTTAAAATTCCCG‑3’；反向引物含有以下核苷酸序列中的一种；R1:5’‑ATGGACCCCCACACAGCA‑3’，R2:5’‑GGACCCCCACACAGCAAA‑3’，R3:5’‑ACCCCCACACAGCAAAGC‑3’，R4:5’‑CCCCACACAGCAAAGCAG‑3’，R5:5’‑CCACACAGCAAAGCAGAA‑3’。