[发明专利]一种抗丙肝病毒的中和性单克隆抗体的制备及其应用有效
申请号: | 201310725893.1 | 申请日: | 2013-12-25 |
公开(公告)号: | CN103642792A | 公开(公告)日: | 2014-03-19 |
发明(设计)人: | 章晓联;任玉珊 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N15/06 | 分类号: | C12N15/06;C12N5/20;C07K16/10;A61K39/42;A61P31/14;G01N33/577;G01N33/576;G01N33/569 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所 42222 | 代理人: | 张火春 |
地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种抗丙肝病毒的中和性单克隆抗体的制备及其应用。用pVAX-CpG-N2N8免疫小鼠后,再用E2蛋白加强免疫;将针对E2抗体效价最高的小鼠取脾作为抗原致敏的B细胞,与骨髓瘤细胞SP2/0株融合,再将融合细胞在HAT培养基中筛选,获取融合细胞生长克隆得到产生本发明单抗的杂交瘤细胞株。本发明的抗丙肝病毒E2的中和性单克隆抗体由所述杂交瘤细胞株产生,该单克隆抗体结合的表位位于E2糖蛋白的F550GCTWMNSTGFTKVCGAPPCVIG572部位。本发明的抗丙肝病毒E2的中和性单克隆抗体具有很好的中和HCV感染能力,可作为丙型肝炎病毒治疗性抗体,在丙肝诊断与治疗中具有巨大应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 丙肝 病毒 中和 单克隆抗体 制备 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种产生抗HCV E2糖蛋白的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株的制备方法,其特征在于包含以下步骤:(1)用重组质粒pVAX‑1‑CpG‑N2N8免疫Balb/c小鼠后,再用E2蛋白加强免疫;检测免疫小鼠血清针对E2蛋白的抗体效价;(2)将针对E2蛋白抗体效价最高的小鼠无菌取脾作为抗原致敏的B细胞,并将其与骨髓瘤细胞SP2/0株融合,再将融合细胞在HAT培养基中筛选,获取融合细胞生长克隆得到产生抗HCV E2糖蛋白的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
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