[发明专利]一种抗丙肝病毒的中和性单克隆抗体的制备及其应用有效
| 申请号： | 201310725893.1 | 申请日： | 2013-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN103642792A | 公开（公告）日： | 2014-03-19 |
| 发明（设计）人： | 章晓联;任玉珊 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12N15/06 | 分类号： | C12N15/06;C12N5/20;C07K16/10;A61K39/42;A61P31/14;G01N33/577;G01N33/576;G01N33/569 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所 42222 | 代理人： | 张火春 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 丙肝 病毒 中和 单克隆抗体 制备 及其 应用 | ||
1.一种产生抗HCV E2糖蛋白的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于包含以下步骤：
（1）用重组质粒pVAX-1-CpG-N2N8免疫Balb/c小鼠后，再用E2蛋白加强免疫；检测免疫小鼠血清针对E2蛋白的抗体效价；
（2）将针对E2蛋白抗体效价最高的小鼠无菌取脾作为抗原致敏的B细胞，并将其与骨髓瘤细胞SP2/0株融合，再将融合细胞在HAT培养基中筛选，获取融合细胞生长克隆得到产生抗HCV E2糖蛋白的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于还包括以下步骤：得到产生抗HCV E2糖蛋白的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株后，通过酶联免疫吸附试验和免疫印记筛选和鉴定后，选出具有高效价抗体水平的杂交瘤细胞株。
3.一种产生抗HCV E2糖蛋白的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于：通过权利要求1或2所述的制备方法制备得到。
4.根据权利要求3所述的抗HCV E2糖蛋白的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于：所述的杂交瘤细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2013172。
5.一种抗HCV E2糖蛋白的中和性单克隆抗体，其特征在于：由权利要求3或4所述的杂交瘤细胞株产生。
6.根据权利要求5所述的单克隆抗体，其特征在于：其结合的表位位于E2糖蛋白的F550GCTWMNSTGFTKVCGAPPCVIG572部位。
7.权利要求3或4所述的杂交瘤细胞株或权利要求5或6所述的单克隆抗体在制备中和HCV感染的药物或免疫制剂中的应用。
8.一种中和HCV感染的药物或免疫制剂，其特征在于：包含权利要求5或6所述的单克隆抗体。
9.权利要求3或4所述的杂交瘤细胞株或权利要求5或6所述的单克隆抗体在制备丙肝诊断与治疗药物中的应用。
10.一种丙肝诊断与治疗药物，其特征在于：包含权利要求5或6所述的单克隆抗体。
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