[发明专利]一种玉米致死性坏死病双重RT-PCR的检测方法无效
申请号: | 201310682010.3 | 申请日: | 2013-12-13 |
公开(公告)号: | CN103667535A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
发明(设计)人: | 李旻;赵明富;丁元明;雷屈文;段禄华 | 申请(专利权)人: | 云南出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 昆明大百科专利事务所 53106 | 代理人: | 何健 |
地址: | 650228 云南省昆明市滇*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 一种玉米致死性坏死病双重RT-PCR的检测方法,本发明包括如下步骤:1)样品RNA提取:对待测样品进行RNA提取;2)对样品的总RNA进行反转录反应;3)用甘蔗花叶病毒和玉米褪绿斑驳病毒的特异性引物同时进行双重聚合酶链式反应;特异性引物为:SCMV1F、SCMV2R、MCMV3333F和MCMV4173R;4)对PCR反应的产物进行电泳检测;5)判断样品是否携带这两种病毒。 | ||
搜索关键词: | 一种 玉米 致死 坏死 双重 rt pcr 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种玉米致死性坏死病双重RT‑PCR的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:1)样品RNA提取:对待测样品进行RNA提取;2)对样品的总RNA进行反转录反应;3)用甘蔗花叶病毒和玉米褪绿斑驳病毒的特异性引物同时进行双重聚合酶链式反应;特异性引物为:SCMV1F、SCMV2R、MCMV3333F和MCMV4173R;引物序列分别为:SCMV1F,YGAHGCCATAAAGAAGGAGTAYG;SCMV2R,GTGTGTCTCTCTGTATTCTCCTG;MCMV3333F,GGTGTACTCGATCGATCAGAC;MCMV4173R,AAACACTTTGGATTGGCAGGAC;4)对PCR反应的产物进行电泳检测;5)判断样品是否携带这两种病毒。
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