[发明专利]BUD13-ZNF259基因单核苷酸多态性的检测方法、试剂盒和应用在审
申请号: | 201310613783.6 | 申请日: | 2013-11-26 |
公开(公告)号: | CN104673882A | 公开(公告)日: | 2015-06-03 |
发明(设计)人: | 李奕润;段世伟;叶华丹;周安楠 | 申请(专利权)人: | 宁波大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人: | 吴瑾瑜 |
地址: | 315211 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及一种用Tm-shift法检测BUD13-ZNF259基因rs964184单核苷酸多态性的方法,在特异性引物5′端分别加入富含GC的序列,3′末端的碱基与SNP的等位基因变异体配对。在上述引物的存在下,在荧光PCR仪中,对血清样品提取的DNA进行PCR扩增,利用熔解曲线分析PCR产物,根据PCR产物的Tm值来判断基因型。该引物可用于制备检测冠心病易感性的试剂盒。本发明的Tm-shift法操作简便,准确度高,重复性好,成本低廉,可用于促进疾病的早期预防和为用药治疗提供参考。 | ||
搜索关键词: | bud13 znf259 基因 核苷酸 多态性 检测 方法 试剂盒 应用 | ||
【主权项】:
BUD13‑ZNF259基因单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,所述的单核苷酸多态性为rs964184,步骤包括:(1)用以下引物对样品DNA进行PCR扩增,引物是包括以下序列的核苷酸片段:(a)特异性上游引物1:5’‑gcgggcagggcggctcaccatctgatgtactgttttcctc‑3’;(b)特异性上游引物2:5’‑gattaccgTCACCATCTGATGTACTGTTTTCCTg‑3’;(c)反向测序引物5’‑TTCATGGAACTTGAAGTCTAGTGGGGA‑3’;(2)PCR产物用荧光定量PCR仪分析熔解曲线,并与用步骤(1)的方法扩增标准样品所制作标准熔解曲线比较,对比PCR产物的Tm值,获得相应的基因分型结果。
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