[发明专利]一种利用数字PCR检测食品中菌落总数的方法无效
申请号: | 201310613501.2 | 申请日: | 2013-11-27 |
公开(公告)号: | CN103667462A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
发明(设计)人: | 陈爱亮;吴英;蒋小玲;吕珍珍;刘金钏;杨曙明 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用数字PCR检测食品中菌落总数的方法。该方法包括如下步骤:1)富集待测食品中的细菌,将富集物与与DNA结合物共同孵育,获得PCR扩增模板;所述DNA结合物为不能穿过完整的细胞膜,但能与细胞膜受损后暴露出来的DNA结合的物质;2)配制PCR反应体系,进行数字PCR反应;所述PCR反应体系中含有所述PCR扩增模板、细菌通用引物对、荧光染料、dNTP和DNA聚合酶;3)根据反应产生的荧光信号,计算所述待测液体食品中的菌落总数。本方法无需对食品中细菌进行分离培养,检测时间缩短至2-3小时;同时大大减少了背景DNA和基质的干扰,灵敏度低至1个拷贝;而且该方法无需设置标准曲线,根据结果可直接判读样品中的菌落总数,大大简化了操作步骤。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 数字 pcr 检测 食品 菌落 总数 方法 | ||
【主权项】:
数字PCR方法在检测食品中菌落总数中的应用。
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