[发明专利]结直肠癌微卫星不稳定性扩增体系及其检测试剂盒

摘要

本发明涉及一种结直肠癌微卫星不稳定性扩增体系及其检测试剂盒，本发该扩增体系包括通用—特异嵌合引物对和通用引物的混合物，通用—特异嵌合引物对分别针对微卫星位点BAT25、BAT26、D2S123、D5S346和D17S250；通用引物是FluD5-Up，通用—特异嵌合引物对中的各个正向引物5’端设有FluD5-Up的序列，所述FluD5-Up为荧光标记引物；本发明的扩增体系及其检测试剂盒克服了不同引物需多种荧光标记的不足，在同一个PCR反应体系中检测5个微卫星基因位点，结果直观可靠，省时高效，可有效的对MSI基因位点进行检测分析。

主权项

一种结直肠癌微卫星不稳定性扩增体系，其特征在于：包括通用—特异嵌合引物对和通用引物的混合物；所述通用—特异嵌合引物对分别针对微卫星位点BAT25、BAT26、D2S123、D5S346和D17S250；所述通用—特异嵌合引物对中的正向引物是Up‑BAT25、Up‑BAT26、Up‑D2S123、Up‑D5S346和Up‑D17S250，相应的反向引物是BAT25‑R、BAT26‑R、D2S123‑R、D5S346‑R和D17S250‑R；所述通用引物是FluD5‑Up，所述通用—特异嵌合引物对中的各个正向引物5’端设有FluD5‑Up的序列，所述FluD5‑Up为荧光标记引物；所述通用—特异嵌合引物对和通用引物的核苷酸序列如下：Prime Name       Prime Sequences（5’‑3’） Up‑BAT25         GCCGTCGAACTGTCACCTCGGCTTTCCTCGCCTCCAAGBAT25‑R          CACTTCAAAATGACATTCTGCAUp‑BAT26         GTCGAACTGTCACCTCGGACAGTTTGAACTGACTACBAT26‑R          CGCTAGTTATCTAATCCAAGUp‑D2S123        GTCGAACTGTCACCTCCATTGCTGGAAGTTCTGGCCD2S123‑R         GACTAACCGTCCCATAGGTGGUp‑D5S346        GTCGAACTGTCACCTCGGCATATGAATACCAGGATAGCD5S346‑R         GCAGAGTATCAATCTTGTACCUp‑D17S250       TCGAACTGTCACCTCGATTTACTGTGGATTGGTAAGTCD17S250‑R        CAGGCATGAGCCACTCAGCTGGCFluD5‑Up         GCCGTCGAACTGTCACCTC。