[发明专利]碱基修饰核苷酸的合成方法及其用途

摘要

本发明公开了一种碱基修饰核苷酸的合成方法及其用途；所述方法包括将各种修饰核苷在磷酸化试剂的作用下，选择性地生成5′-核苷三磷酸；这些磷酸化试剂包括反应过程中原位生成的环状磷酸化试剂以及三氯氧磷和三丁基焦磷酸铵协同作用下的反应产物。本发明合成的碱基修饰核苷酸在DNA测序、标记、延伸等生物学领域广泛使用，目前其销售价格很高，合成方法复杂，反应选择性差，副反应多，不好分离纯化；而本发明提供的合成方法选择性好，副反应少，容易分离纯化，且所需实验条件易得，合成过程均为常规化学反应，可用于大规模推广使用。

主权项

1.一种碱基修饰核苷酸的合成方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：A、5-碘-2’-脱氧胞苷5-碘-2’-脱氧尿苷或7-碘-2’-脱氧腺苷与化合物在Pd/Cu催化剂作用下发生偶联反应得化合物dC(AP₃)dU(AP₃)或dA(AP₃)或是，5-碘-2’-脱氧尿苷与化合物烯丙基胺在Pd催化剂作用下发生偶联反应得烯丙基尿苷dU烯丙基B、化合物dC(AP₃)、dU(AP₃)、dA(AP₃)或烯丙基尿苷dU烯丙基与环状磷酸化试剂发生磷酸化反应，再经氧化、水解开环，即得丙炔胺修饰的核苷酸dCTP(AP₃)dUTP(AP₃)或dATP(AP₃)或烯丙基修饰的核苷酸dUTP-烯丙基