[发明专利]一种等位基因特异性甲基化中筛选杂合子的方法无效
申请号: | 201310518506.7 | 申请日: | 2013-10-29 |
公开(公告)号: | CN103589791A | 公开(公告)日: | 2014-02-19 |
发明(设计)人: | 王景文 | 申请(专利权)人: | 王景文 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种等位基因特异性甲基化中筛选杂合子的方法。首先在TIMP3基因启动子区和第一外显子区寻找全部CCGG序列和SNP位点,然后结合等位基因特异性PCR技术和甲基化敏感性限制性酶切—PCR法,对TIMP3的一对等位基因启动子区CpG岛的甲基化状态进行特异性检测,在DNA水平应用AS-PCR技术在组织标本中筛选该位点杂合子;在DNA水平应用AS-PCR技术在细胞系中筛选该位点杂合子;如果两个pcr反应均有产物,则该样本为SNP杂合子。本发明的有益效果是,可以有效阻碍转录因子与启动子结合,导致转录失活,合成成熟功能蛋白受阻而导致细胞增殖失控。 | ||
搜索关键词: | 一种 等位基因 特异性 甲基化 筛选 合子 方法 | ||
【主权项】:
一种等位基因特异性甲基化中筛选杂合子的方法,其特征在于,首先在TIMP3基因启动子区和第一外显子区寻找全部CCGG序列和SNP位点,然后结合等位基因特异性PCR技术和甲基化敏感性限制性酶切—PCR法,对TIMP3的一对等位基因启动子区CpG岛的甲基化状态进行特异性检测,在DNA水平应用AS‑PCR技术在组织标本中筛选该位点杂合子。
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