[发明专利]一种可用于大规模生产的MSTN酵母菌种的构建方法

摘要

本发明公开了一种可用于大规模生产的MSTN酵母菌种的构建方法，该方法步骤为：KanMX4基因片段的扩增和pBlue-KanMX4载体的构建；酵母基因同源臂的插入；pBlue-kan-NTS2-5’3'-MSTN整合载体的构建；将MSTN载体整合入酵母基因组；抗性基因KanMX4的敲除。本发明构建了不含有筛选基因的Myostatin整合型酵母菌株，该菌种可以在富集型培养基中生产，安全可靠成本低，不会造成目的基因丢失，适合于大规模生产重组酵母，采用本发明大规模生产的酵母菌株直接饲喂动物，可在动物体内产生高水平MSTN特异性抗体，解除其抑制作用，促进肌肉生长，这对动物生产具有重要意义。

主权项

一种可用于大规模生产的MSTN酵母菌种的构建方法，其特征在于，该可用于大规模生产的MSTN酵母菌种的构建方法包括以下步骤：步骤一、KanMX4基因片段的扩增和pBlue‑KanMX4载体的构建；步骤二、酵母基因同源臂的插入；步骤三、pBlue‑kan‑NTS2‑5’3'‑MSTN整合载体的构建；步骤四、将MSTN载体整合入酵母基因组；步骤五、抗性基因KanMX4的敲除。