[发明专利]microRNA的测序试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 201310376423.9 | 申请日： | 2013-08-26 |
| 公开（公告）号： | CN103509863A | 公开（公告）日： | 2014-01-15 |
| 发明（设计）人： | 张安强;蒋建新;顾玮;曾灵;杨策 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学第三附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京元本知识产权代理事务所 11308 | 代理人： | 周维锋 |
| 地址： | 400042 *** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物领域，特别涉及核酸的检测技术，具体为microRNA的测序方法，根据靶位点设计待测microRNA的特异性的扩增引物和待测microRNA的焦磷酸测序引物，所述扩增引物的其中一条引物被生物素标记；提取待测样本的DNA，用设计的所述扩增引物进行PCR扩增反应，得扩增引物，其中，所述特异性扩增引物中的任一条用生物素标记；将所得PCR扩增物采用碱变性分开成单链，取其中生物素标记单链PCR扩增产物纯化后，与所述测序引物进行杂交反应，并分析结果;本发明所选取的microRNA靶序列，以及应用本发明的试剂盒能够实现快速、简便、准确、高效、实用、经济的检测microRNA基因型，能够满足临床检验实际工作的需要，利于microRNA基因检测预测疾病的发生、发展风险。 | ||
| 搜索关键词： | microrna 试剂盒 及其 应用 | ||
【主权项】：
microRNA的测序方法，其特征在于，所述测序方法为焦磷酸测序法，或结合二重PCR扩增技术，具体包括以下步骤： A特异性引物的设计引物设计 根据靶位点设计待测microRNA的特异性的扩增引物和待测microRNA的焦磷酸测序引物，所述扩增引物的其中一条引物被生物素标记； B PCR反应 提取待测样本的DNA，用步骤A涉及的所述扩增引物进行PCR扩增反应，得扩增引物，其中，所述特异性扩增引物中的一条用生物素标记； C焦磷酸测序 将步骤B所得PCR扩增物采用碱变性分开成单链，取其中生物素标记单链PCR扩增产物纯化后，与步骤A所述测序引物进行杂交反应，并分析结果。
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