[发明专利]一种新城疫病毒的检测方法

摘要

本发明提供了一种新城疫病毒的检测方法，其操作程序是：选取现有DNA序列数据库（GENEBANK）中新城疫病毒（NDV）的核蛋白（NP）基因序列进行同源性对比，根据其保守区域，设计出针对各基因片段的引物及探针；然后对引物和探针进行合成及修饰，将特异性探针通过与荧光编码微球进行偶联，制成特异性检测微球（即液相芯片），液相芯片能够特异性识别各基因片段的PCR扩增产物，并通过液相芯片检测仪读出检测结果。本发明有着灵敏性高，特异性强，重复性高，操作简便，耗时短，成本相对低、使用安全等优点。

主权项

一种新城疫病毒的检测方法，其特征在于包括以下步骤：（一）、设计引物及探针：选取现有DNA序列数据库（GENEBANK）中新城疫病毒（NDV）的核蛋白（NP）基因序列进行同源性对比，根据其保守区域，设计出针对各基因片段的引物及探针；（二）、合成及修饰引物和探针：下游引物及探针反向互补序列RC‑Probe的5’端标记生物素，得到特异性检测引物，探针Probe的5’‑C6标记氨基，得到特异性探针，所述引物和探针序列分别为：引物：ND(NP基因)：201bp(198‑398)P1：5’‑CCTCGTCTCAG ACAGGGTCAA‑3’，P2：5’‑CGGCACCTATAAAGCGTTTT TG‑3’，探针及其反向互补序列：Probe：5’‑TCCTCTTGGCGATT CCATCCGC‑3’，RC‑Probe：5’‑GCGG ATGGAA TCGCCA AGAAGA‑3’；（三）、特异性探针通过与荧光编码微球进行偶联，制成特异性检测微球（即液相芯片）；液相芯片能够特异性识别各基因片段的PCR扩增产物，并通过液相芯片检测仪读出检测结果。