[发明专利]一种产L-谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法及其应用无效
| 申请号： | 201310309739.6 | 申请日： | 2013-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN103388002A | 公开（公告）日： | 2013-11-13 |
| 发明（设计）人： | 刘立明;牛盼清;董晓翔 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/76 | 分类号： | C12N15/76;C12N9/06;C12P7/46;C12R1/465 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明阐述了一种产L-谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法及其应用，属于基因工程与酶学品领域，将重组产生的谷氨酸氧化酶包涵体进行蛋白变性、复性和浓缩，使30％的蛋白包涵体恢复活性，通过对重组酶的酶学性质研究，发现重组酶最适pH8.5，最适温度35℃，Mn2+可以使酶比活力提高20％以上，而外源添加FAD对酶活力没有影响；结合酶学特征，将重组酶添加到含有20g/L的谷氨酸钠pH8.5的缓冲液中，35℃转化12h可以生成8.3g/L的α-酮戊二酸。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 谷氨酸 氧化酶 重组 菌株 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种产L‑谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法，其特征如下：1)通过构建重组质粒，将谷氨酸氧化酶基因表达于E.coli BL21中构建重组菌株，该菌株具有产生L‑谷氨酸氧化酶的能力；2)菌株产生的L‑谷氨酸氧化酶是包涵体，没有蛋白质活性。
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