[发明专利]一种适用马铃薯品种“川芋10号”转基因方法无效
| 申请号： | 201310303556.3 | 申请日： | 2013-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN104293825A | 公开（公告）日： | 2015-01-21 |
| 发明（设计）人： | 李立芹;王西瑶;鲁黎明;倪苏;刘帆;杨先泉;曾富春;彭茂林 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H4/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 611130*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明提供一种适用马铃薯品种“川芋10号”转基因方法，该方法的特征在于第一天充分培养农杆菌，第二天按一定比例稀释菌液继续培养待OD600=0.3时取出，5000rpm离心3min，弃上清，加入液体MS重悬菌体。在超净工作台中将试管薯放在被少量无菌水浸湿的滤纸上，切成1-2mm厚的薄片（顶端和底部舍去），转移试管薯切片至重悬菌体中浸染5min左右。然后将薯片移至无菌滤纸上吸干水分，接着将薯片平放入共培养基上，在24℃黑暗中共培养2d。共培养后，放入含500mg/L Cef+500mg/L Carb的无菌水中清洗3～4遍，吸干水分后转入芽筛选培养基中。每隔12d左右换1次新鲜的芽筛选培养基。30d之后可见从薯肉中长出的芽，待芽长到2～3cm左右时，剪下接入生根筛选培养基中进行生根。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 适用 马铃薯 品种 川芋 10 转基因 方法 | ||
【主权项】：
将挑取含有目的基因的农杆菌单菌落接种至5mL液体LB中（含50 mg/L 卡纳霉素和50 mg/L 利福平），200rpm 28℃培养过夜，二天按1：200的比例稀释菌液于新鲜的液体LB中，继续培养待OD600=0.1‑0.3时取出备用。
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