[发明专利]一种获得微环DNA的亲本质粒及其应用有效
申请号: | 201310229687.1 | 申请日: | 2013-06-09 |
公开(公告)号: | CN104232676B | 公开(公告)日: | 2018-08-07 |
发明(设计)人: | 马晴雯;刘浏;曾凡一 | 申请(专利权)人: | 上海市儿童医院;上海滔滔转基因工程股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/79 | 分类号: | C12N15/79;C12N1/21;A61K48/00;C12R1/19 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人: | 朱水平;沈利 |
地址: | 200040 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种获得微环DNA的亲本质粒及其应用。该亲本质粒是在出发载体pEGFP‑N1‑attB质粒中插入attR片段和attL片段以及ΦC31整合酶基因表达盒构建而成,所述attR片段插入出发载体限制性内切酶SpeⅠ和DraⅢ的酶切位点之间,所述attL片段插入出发载体的限制性内切酶AflⅢ和AseⅠ的酶切位点之间,所述ΦC31整合酶基因表达盒插入出发载体的限制性内切酶AflⅢ的酶切位点。利用该亲本质粒能够快速、高效、经济地获得用于稳定整合的微环DNA,后续的转基因操作方法简单易行,具有重要的生物学意义及实际应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 获得 dna 亲本 质粒 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种获得微环DNA的亲本质粒,其特征在于,所述亲本质粒是在真核表达载体pEGFP‑N1‑attB质粒中插入attR片段和attL片段以及ΦC31整合酶基因表达盒构建而成,其中所述attR片段插入pEGFP‑N1‑attB质粒的限制性内切酶SpeⅠ和DraⅢ的酶切位点之间,所述attL片段插入pEGFP‑N1‑attB质粒的限制性内切酶AflⅢ和AseⅠ的酶切位点之间,所述ΦC31整合酶基因表达盒插入pEGFP‑N1‑attB质粒的限制性内切酶AflⅢ的酶切位点。
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