[发明专利]一种评估微生物产电能力的简易高效方法

摘要

本发明公开了一种评估微生物产电能力的简易高效方法，属于细菌学和分子生物学领域。将经过化学或物理诱变的产电微生物稀释后平板涂布并进行厌氧培养，根据平板上脱色透明圈的大小以及单克隆的大小形态，筛选具有优良产电效能的产电微生物。这种新型筛选方法思路新颖，能够显著提高筛选效率，缩短筛选时间，且准确率高。因此本方法具有方便、快捷、适应范围广等特点，在产电微生物研究领域具有很强的实际应用价值。

主权项

一种评估微生物产电能力的简易高效方法，其特征在于，采用的菌株是模式产电微生物Shewanella oneidensis MR‑1，诱变剂是甲基磺酸乙酯，指示剂是不能进入细胞的、且能够被Shewanella oneidensis MR‑1降解脱色的染料，评估方法按照下述步骤进行：（1）挑取Shewanella oneidensis MR‑1单克隆，接入50ml酵母膏蛋白胨液体培养基，培养基含酵母提取物5g/l、蛋白胨10g/l和NaCl l0g/l，在好氧条件下于30℃，180rpm震荡培养至对数后期；（2）取步骤（1）所得对数后期的菌体1ml，在超净工作台中加EMS20μl，上下颠倒混匀后置于30℃摇床内，180rpm震荡培养1h；（3）将步骤（2）诱变好的菌体稀释到1×103CFU/ml，取100μl的菌液涂布预先制备好的固体平板；所用固体平板为Shewanella oneidensis MR‑1矿物盐培养基中添加1.8%的琼脂B和200mg/l的指示剂，琼脂B的pH=7.0；（4）将步骤（3）中涂布好菌液的固体平板倒置于厌氧罐中，将厌氧罐中充满高纯氮气，于30℃避光培养，进行产电微生物对固态染料的脱色，形成大小不一的脱色透明圈；（5）根据固体平板上单克隆周围脱色透明圈的大小以及单克隆的大小形态，筛选出产电能力高的产电微生物；（6）将步骤（5）选出的产电微生物进行液体培养基脱色实验，进一步验证各个菌的脱色能力。